Flash-KO 技术平台
基因敲除细胞系构建技术平台——高效、精准、稳定
EVO视讯 EVO真人生命基因可为科研及工业客户给予专业基因敲除细胞系构建服务，依托优化 CRISPR 编辑技术、多元递送方案与高精度筛选体系，攻克原代细胞、干细胞、类器官等难转染细胞的编辑难题。
基因编辑的核心瓶颈在于高效低毒的细胞递送。公司自研FLASH 广谱基因编辑递送平台，顺利获得蛋白 / 核酸共递送载体，实现 RNP 复合物高效递送，兼顾低毒性与高编辑效率；搭配全流程标准化服务，保障交付细胞系遗传背景均一。
现在 FLASH 系统已适配 400 + 细胞系，成功构建了超过4500种基因敲除细胞模型，这些模型已被制药公司和研究组织广泛应用于功能基因组学、遗传疾病机制研究、药物靶点验证以及合成生物学工程等领域。
1) 广谱高效：已成功覆盖400余种细胞系，53%的细胞系顺利获得基因组测检测到敲除效率突破80%，尤其擅长iPSC、hESC、类器官及免疫细胞等传统技术难以转染的细胞类型；
2) 已验证的全基因组sgRNA：结合数千例项目经验，独创sgRNA设计逻辑，具有经过实验验证的全基因组sgRNA；
3) 细胞筛选无忧：采用德国cytena公司顶级3D细胞打印系统UP.SIGHT，高效挑选阳性单克隆；
4) 极低细胞毒性：采用创新蛋白递送系统，彻底规避DNA质粒导致的免疫原性反应与随机整合风险，转染后24-48h细胞存活率保持在90%以上；
5) 周期缩短：FLASH-KO技术无需进行抗性筛选，极限周期缩短至5周。
1) 单基因敲除
2) 多基因敲除
3) 片段敲除
案例一：部分细胞系高效敲除数据展示
为验证FLASH系统的广谱适用性与高效性，我们选取了近百株不同组织来源、不同物种的细胞系进行基因敲除测试，涵盖肿瘤细胞、正常永生化细胞、干细胞、免疫细胞、类器官等类型。结果显示：
✓ 53% 的细胞系敲除效率 >80%
✓ 88% 的细胞系敲除效率 >30%
✓ 即使在iPSC、hESC、原代T细胞、类器官等传统难转染细胞中，敲除效率也显著优于传统方法。
案例二：iPSC (CIITA、B2M) 双基因敲除
➢ 挑战：iPSC难转染，传统方法效率<5%
➢ 方案：采用FLASH共递送两个sgRNA
➢ 成果：CIITA基因编辑效率达到81%，B2M基因靶点效率达到71%，8周取得纯合双敲除单克隆株，多能性未受影响。
案例三：Huh6细胞基因片段敲除
➢ 挑战：精确删除较大基因组区域（通常为几百到几千个碱基对），移除基因的关键外显子或功能域。
➢ 方案：采用FLASH-KO共递送多条sgRNA，实现精确删除
➢ 成果：仅用8周，成功在Huh6细胞中实现精确小片段敲除。
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